二、实验仪器及药品    

(1)STE的配制(表3-1)
表3-1 STE(100mL)配方

试剂名称

试剂等级

用量

最终浓度

5mol/L NaCl

分析纯

2mL

0.1mol/L

1mol/L Tris-HCl(pH8.0)

分析纯

1mL

10mmol/L

0.5mol/L EDTA(pH8.0)

分析纯

200μL

1mmol/L

dH2O

不需灭菌

up to 100mL

在60mL dH2O中加入5mol/L NaCl 2mL、1mol/L Tris-HCl(pH8.0) 1mL和0.5mol/L EDTA(pH8.0) 200μL,混匀,加dH2O定容至100mL,1.034×105Pa高压蒸汽灭菌15min,备用。配制好的STE含有0.1mol/L NaCl,10mmol/L Tris-HCl和1mmol/L EDTA。
(2)溶液I的配制(表3-2)
表3-2 溶液I(100mL)配方

试剂名称

试剂等级

用量

最终浓度

葡萄糖

分析纯

0.9g

50mmol/L

1mol/L Tris-HCl(pH8.0)

分析纯

2.5mL

25mmol/L

0.5mol/L EDTA(pH8.0)

分析纯

2mL

10mmol/L

dH2O

不需灭菌

up to 100mL

60mL dH2O中加入0.9g葡萄糖、1mol/L Tris-HCl(pH8.0) 2.5mL和0.5mol/L EDTA(pH8.0) 2mL,混匀,加dH2O定容至100mL,1.034×105Pa高压蒸汽灭菌15min,4℃贮存。配制好的溶液I含有50mmol/L葡萄糖,25mmol/L Tris-HCl和10mmol/L EDTA。
(3)溶液II的配制(表3-3)
溶液II中含有0.4mol/L NaOH和1% SDS,该试剂需要新鲜配制,配制后将NaOH和SDS按1:1的比例混合。

表3-3 溶液II(1mL)配方

试剂名称

试剂等级

用量

最终浓度

5mol/L NaOH

分析纯

40μL

0.4mol/L

dH2O

不需灭菌

up to 500μL

2%SDS

分析纯

500μL

1%

dH2O

不需灭菌

up to 500μL

(4)溶液III的配制(表3-4)
表3-4 溶液III的配制(100mL)

药品名称

用量

5mol/L KAc

60mL

冰醋酸

11.5mL

dH2O

28.5mL

配制好的溶液III含3mol/L KAc、5mol/L冰醋酸(pH4.8)。

 

 

 
 

 

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