利用DNA快速纯化回收试剂盒回收纯化各片段，回收产物琼脂糖凝胶电泳（图4-5）并粗略估算浓度。
图4-5中，M为100bp DNA ladder plus；1-2为冷激蛋白启动子cspA1PCR产物回收，其大小为531bp；3-4为cspA2PCR产物回收，其大小为382bp；5-6为cspA3PCR产物回收，其大小为575bp。
挑取琼脂培养板上的“白斑”单菌落，移至3mL LB（Amp+）液体培养基中，37℃剧烈摇荡培养过夜，提取质粒pMD 18 T-cspA1、pMD 18 T-cspA2以及pMD 18 T-cspA3，电泳鉴定（图4-6）。
图4-6中，M为1kp DNA ladder plus；A1-5为pMD 18 T-cspA1，其大小为3223bp；B6-10为pMD 18 T-cspA2，其大小为3074bp；C11-15为pMD 18 T-cspA3，其大小为3267bp。
利用限制性内切酶酶切鉴定连接方向，结果如图4-7所示。图中，M为1kb DNA ladder plus；1-3为pMD 18 T-cspA1经Bgl II/Kpn I双酶切后结果，其中2、3可见526bp双酶切产物，为正向连接；4-6为pMD 18 T-cspA2经Bgl II/Kpn I双酶切后结果，其中4、6可见377bp双酶切产物，为正向连接；7-9为pMD 18 T-cspA3经Bgl II/Kpn I双酶切后结果，其中7、8可见570bp双酶切产物，为正向连接。
